摘要 Osterix(Osx)是一种具有锌指结构的转录因子,对骨形成十分重要. 但到目前为止,直接接受Osterix调控的靶基因尚不清楚.用骨形态发生蛋白2(bone morphogenetic protein 2,BMP2)诱导原代培养小鼠成骨细胞的骨分化,定量RTPCR检测Ⅰ型胶原蛋白(collagen Ⅰ a 1, Col1a1)与Osx的转录水平.结果发现,二者的转录时相具有相同的变化模式.为了确定二者之间的关系,采用腺病毒表达系统在原代成骨细胞中过表达Osx. 数据表明,Osx能够明显上调 Col 1a1的转录水平.用EMSA(electromobility shift assay)检测这些过表达 Osx 基因的成骨细胞核抽提物,迁移条带的出现表明,Osx能够直接与 Col 1a1的启动子相结合.结果提示,在原代培养的成骨细胞中,Osterix通过直接与启动子相结合,调控Col1a1基因的转录. Abstract :Osterix (Osx) is a zincfingercontaining transcription factor playing an important role in osteogenesis,but controlling down target genes of Osx remain to be unclear. Bone morphogenetic protein 2 (BMP 2) was used to induce osteocyte differentiation of primarily cultured mouse osteoblasts, transcriptional level of  Col 1a1 and Osx were determined by quantitative RTPCR. As a result, the time course of the transcriptional level of these two genes shared the same pattern. To determine their relationship, Osx was overexpressed in the primary osteoblasts by using adenovirus system. The data showed that Osx could upregulated the transcription level of  Col 1a1 significantly. Nuclear extracts of the osteoblast, in wich Osx was overexpressed, were analyzed by electromobility shift assay (EMSA), the presence of the shift band demonstrated the binding of Osx to the promoter of  Col 1a1. Our results suggest that, in the primarily cultured mouse osteoblasts, Osx directly regulated the transcription of  Col 1a1 through binding to its promoter Key words osteoblast osterix Col1a1  BMP-2 潘秋辉;马纪;于永春;孙奋勇. 转录因子Osterix对成骨细胞 Col1a1 基因的反式激活作用[J]. 中国生物化学与分子生物学报, 2007, 23(11): 921-925. PANQiu-Hui;MAJi;YUYong-Chun;SUNFen-Yong. Trans--activation of  Col 1a1 Promoter by Osterix During Osteocyte Differentiation. Chinese Journal of Biochemistry and Molecular Biol, 2007, 23(11): 921-925. 谢艳芳,石文贵,周 建,高玉海,王鸣刚,陈克明. 正弦电磁场促进成骨细胞成熟分化依赖于BMP-Smad信号通路 [J]. 中国生物化学与分子生物学报, 2016, 32(3): 305-311. 闫娟丽 王鸣刚 陈克明 葛宝丰 周建 马小妮 宋鹏 成魁. 不同强度50 Hz脉冲电磁场促进大鼠颅骨成骨细胞矿化成熟最佳参数的筛选 [J]. 中国生物化学与分子生物学报, 2014, 30(7): 721-729. 陈祥和 李世昌 孙朋. microRNAs在骨形成中的作用——运动调控骨代谢的新机制 [J]. 中国生物化学与分子生物学报, 2013, 29(12): 1128-1135. 曹军军 杨茂伟 郭宝磊 梁单. 高糖通过线粒体途径诱导成骨细胞凋亡 [J]. 中国生物化学与分子生物学报, 2012, 28(12): 1109-1114. 杨周岐 , Fredrick M. Pavalko,商澎. Nmp4促进TNF-α诱导的成骨细胞凋亡 [J]. 中国生物化学与分子生物学报, 2010, 26(9): 828-835. 杨周岐,商澎. Nmp4/CIZ对成骨细胞功能的调节作用 [J]. 中国生物化学与分子生物学报, 2010, 26(06): 498-504. 孟芮,罗明志,王亮,高翔,狄升蒙,商澎. 三维回转骨细胞条件培养基对成骨细胞功能的调节作用 [J]. 中国生物化学与分子生物学报, 2010, 26(02): 181-188. 潘秋辉,李益广,杨松海,马纪,谢在春,于永春,孙奋勇. 骨形态发生蛋白2通过Smad途径上调Osterix的表达 [J]. 中国生物化学与分子生物学报, 2008, 24(01): 40-45. 郭若霖,郑红,郭善一,郭刚,张镜宇. 改进竞争性RT-PCR法测定缺碘大鼠颅骨中BMP-2基因表达变化 [J]. 中国生物化学与分子生物学报, 2003, 19(03): 372-376.
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