色谱柱管理要点简单讲
1.目的：
建立色谱柱管理，规范色谱柱的购买、接收、保存、使用、清洗、老化和报废 等操作
2.色谱柱申购
色谱仪器操作人员根据检验样品的要求，提岀申请购买相应的色谱柱。申请表应注明型号、填料、柱规格、厂家、购买数量、用途。
申请表经QC主任审核，质量负责人批准后，交釆购部门釆购。
3.色谱柱的领取和验收
色谱柱购买回来后，统一领取 ； 领取时应认真核对实物与色谱柱购买申请表是否一致,确认无误后领取。 新色谱柱购入时,每一根新购进的色谱柱必须登记，内容包括：购进时间、生产公司、型号、原厂编号、填料、规格等。 色谱柱的验收：色谱柱领回实验室后，验收人检查外包装、封口和标签是否完好，若有被拆封过，应拒收。
4.色谱柱编号
色谱柱编号按“ZLB+色谱柱类型+年份+两位流水号”，色谱柱类型按用途分类，分别 为液相色谱柱（LC）、气相色谱柱（GC）。编号举例，ZLB-LC-2019-01或者ZLB-GC-2019-01。
5.色谱柱分类
高效液相色谱柱通常分为正相柱和反相柱。正相柱大多以硅胶为柱，或是在硅胶表 面键合-CN,-NH3 官能团的键合相硅胶柱；反相柱填料主要以硅胶为基质，在其表面键合非 极性的十八烷基宫能团（ODS）简称为C18柱。《中国药典》中以C18柱为最常用。
液相色谱柱的使用及保存
6.液相色谱柱的使用说明
使用前注意事项
（1）色谱柱的贮存液若无特殊说明，均为有机溶剂，反相色谱柱常用甲醇、乙腊或者高 比例的的甲醇/乙臆-水溶液，正相柱常用脱水处理后的纯正己烷。
（2）使用前，一定要注意色谱柱的贮存液与待分析样品的流动相之间是否互溶；有些色 谱柱（如氨基柱或氤基柱），既可用于正相体系，也可用于反相体系，如色谱柱中的贮存液 为正相（环己烷）而使用条件为反相时，必须用异丙醇先置换掉色谱柱内的贮存液，然后再 用反相条件，否则将会明显减少色谱柱的使用寿命。
（3）在反相色谱柱中，如果流动相中缓冲盐的浓度较高（NO.lmol/1）,必须先用低浓 度的甲醇/乙腊-水溶液（10%〜20%）冲洗120min,否则缓冲液在高浓度的有机相中很容易 析出，从而使色谱柱堵塞，无法极复。
（4）色谱柱使用方向 装色谱柱时应使流动相流路德方向与色谱柱标签上箭头所示方 向一致。除另有规定外，不宜反相使用，否则会导致色谱柱柱效明显降低，无法恢复。
7.流动相
（1）流动相中所使用的各种有机溶剂应尽可能使用色谱纯，水最好为超纯水或种蒸馅 水，如果流动相含盐，还应将配置好的流动相经0. 45um或0.22um的滤膜过滤。另外装流动 相的容器和色谱系统的在线过滤器等装置应清洁，否则将影响色谱柱寿命。
（2）以硅胶为基质的各种键合相对酸和碱都很敏感，一般pH使用范围为2. 5〜7. 5,应 参阅色谱柱使用说明书，配置好流动相后，必要时测定pH值，防止pH过酸过碱，以色谱柱 填料不可逆性损坏。
（3）样品样品溶液经0. 45um或0. 22um的滤膜过滤，或用固相萃取小柱（SPE）对样品 溶液进行预处理；如样品成分复杂，部分组分有可能吸附在色谱柱上，最好使用前置保护柱。 在用正相色谱分析样品时，如无特殊要求，所有溶剂和样品应严格脱水。
8.液相色谱柱的保养
反相色谱柱用后的保存 如使用缓冲液或含盐溶液作为流动相，每天实验结束后， 应用10倍柱体积（对150mm柱长，约15ml）的低浓度的甲醇/乙腊-水溶液（10%〜20%）冲 洗120min,使色谱柱内的盐完全溶解洗脱除出，最后用高浓度的甲醇/乙腊-水溶液（80%〜 100%）冲洗30min,使色谱柱中的强吸附物质被冲洗出来。
9.色谱柱的长期保存
反相柱，可以贮存于甲醇或乙月青中，正相柱可以贮存于经脱水处理后的正己烷中，离子 交换柱可以贮存于5%甲醇或含0.05%叠氮化钠的水中，并将色谱柱两端的堵头堵上，以免干 枯，室温保存。
10.色谱柱的维修
色谱柱使用一段时间后，会发生柱压上升、柱效降低的现象。这主要是柱床上端或过滤 片处积累了污染物，可通过再生予以消除。如果色谱柱性能突然变坏，可釆取以下方法处理：
☆如果柱压突然增大，可将色谱柱出、入口端颠倒过来，用10-20倍柱体积的流动 相冲洗。如果柱压仍然很高，可能是柱入口处的过滤片堵塞，需要更换新滤片；
☆如果峰形变坏（如出现肩峰或双峰），表明柱入口柱床可能有塌陷，可用同型号填 料和流动相配成匀浆，将塌陷处填平。
11.色谱柱再生
☆正相柱按极性增大的顺序，依次用20〜30倍柱体积的正己烷、二氯甲烷和异丙醇 冲洗色谱柱，然后，按反顺序冲洗，最后用干燥的正己烷平衡。
☆反相柱首先用蒸馅水冲洗，再分别用20〜30倍柱体积的甲醇和二氯甲烷冲洗，然 后按相反顺序冲洗，最后用流动相平衡。
☆离子交换柱在低离子强度的缓冲液中长期使用会导致色谱柱失活，用稀酸缓冲液可 使阳离子交换柱再生，再用稀碱缓冲液可使阴离子交换柱再生。
☆氨基柱，分析糖类的氨基柱可用0. 02nmiol/l的磺酸溶液冲洗，然后用水平衡。 4.6气相色谱柱的使用及保存
本公司使用的气相色谱柱为毛细管柱。
12.毛细管柱安装
☆毛细管柱安装从柱架上将色谱柱两端各拉出大约0.5m,以用于进样口和检测器安装, 避免色谱柱折断；
☆在柱两端安装柱接头和石墨密封垫圈，•向下套柱接头和密封垫圈，离端口大约5cm。 在距柱两端大约4-5cm用柱切割器（一般为带有刃口的陶器片）与柱垂直的来回切割柱，但注 意不要切断，然后用两只手的拇指和食指尽量靠近切割点抓牢」轻轻地弯曲柱子，柱会很容 易折断，为确保柱两头切口截面没有聚酰亚胺和玻璃碎片，可用放大镜检查切口。
☆在进样口安装色谱柱时，先查看仪器说明书找到正确的插入距离，并且用涂改液把 这个距离标岀来。
☆将色谱柱插入检测器，用手指拧紧螺帽直到它固定色谱柱，然后再拧螺帽1/4-1/2 圈，这样加压时色谱柱不会从接头处脱出来。
☆打开载气，确定合适的流速，将色谱柱一端侵入丙酮瓶中检查是否有气泡。将色谱 柱安装到检测器上时，查看仪器说明书所提供的正确插入距离。
13.毛细管柱的老化
☆新的毛细管柱在使用前需要老化，以除去残留溶剂及低分子量的聚合物。此外，用 过的柱也应定期老化，尤其是出现基线飘移，某些色谱峰开始拖尾时，应该进行老化以除去 样品中的难挥发物在柱头积累。
☆老化操作在比最高温分析温度高20°C或最髙柱温（温度更低者）的条件下老化柱子 2h,如果在高温lOmin后背景不下降，立即将柱子降温并检查柱子是否有泄漏。如果用Vespel 密封圈的话，老化完成后重新检查密封程度。
14.毛细管柱维护与保养
☆为了延长柱的使用寿命，要用够纯度的载气，载气中的含氧量不宜高于IXIOVg， 并且利用净化器除去较低级别气体中的氧气和碳氢化合物杂质，定期更换气体净化器填料， 要及时更换毛细管柱密封垫以确保整个系统必须没有泄漏。
☆要确保样品中部不存在非发性物质，因为氧和污染物对固定液的分解有催化作用， 会导致柱流失增强。
☆毛细管柱的前端和末端数厘米最容易损坏，如不挥发物的积累，进样溶剂的侵蚀， 高温以及机械损伤等。可以在装柱之前切除这受损害的几厘米，切除时切口应平整。
☆毛细管柱如不使用，应小心存放，可用硅橡胶块将两端封闭，至于盒中。
15.色谱柱的系统适用性实验
对于每次试验用色谱柱均要进行系统适应性试验，检验其重现性，以保证检验准确性, 消除潜在风险。
16.报废
色谱柱的报废没有具体的时间，有些色谱柱不能用于测定某一检体时但可用于测定其他 的检体，一般经过多次维护后或检测多个检体时柱压仍太高或柱效仍太低时，可以依照色谱 柱说明书进行条件测试，如测试达不到要求，可以申请报废，由QC主任审核，质量负责人 负责批准。
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