研究与 体内 实验模型的适应性免疫识别能力,根据他们的T细胞抗原受体(TCR)的特异性的T细胞的基本需要。许多的间接的方法是可在其中通过测量确定的官能反应,如增殖,细胞因子的产生,或活化标志物的表达的 1 与特定的抗原和表位的特异性T细胞 在体外 刺激T细胞堆积人口。然而,这些方法只能识别特定表位的T细胞表现出的许多可能的功能之一,它们是不够敏感检测表位特异性的T细胞在幼稚前体频率。一种流行的选择是TCR基因转殖继转移模型,其中单克隆T细胞的TCR转基因小鼠接种到组织相容性的主机创建一个大的前体人口的表位特异性的T细胞,可以EASI光年跟踪与一个同类系的标记抗体 2,3 使用。虽然功能强大,该方法遭受从实验与工件的非生理性T细胞的频率与一个单一的抗原决定簇特异性的 4,5。 此外,该系统不能被用于研究的功能内的异质性的表位特异性的T细胞克隆的多克隆人口。
理想的方式来学习适应性免疫应包括使用的方法,区分TCR特异性完全由结合到同源肽:MHC(住房抵押贷款公司)的直接检测表位特异性T细胞的内源性T细胞库。住房抵押贷款公司的四聚体和流式细胞仪的使用来完成这 6, 但被限制在检测高频只符合下列抗原诱导的克隆扩增的特定表位的T细胞群体。在这个协议中,我们描述了一种方法,协调使用的住房抵押贷款公司四和磁学抽动细胞富集技术,使极低频小鼠淋巴组织 3,7的 特定表位的T细胞的检测。利用这种技术,人们可以全面跟踪整个在小鼠内源性T细胞表位的特定人群的免疫反应的所有阶段。